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Técnicas para un diagnóstico certero y precoz de COVID 19

Dr. SempereDisponer de herramientas para un diagnóstico rápido de casos, es esencial para: identificar, aislar y tratar los pacientes afectados y así contribuir a la mitigación de la propagación y expansión de la enfermedad.

 

El laboratorio de HC Marbella, liderado por nuestro microbiólogo el Dr. Marco Antonio Sempere Alcocer, implementó ya desde el 11/03/2020 la técnica de diagnóstico de referencia por RT-PCR.

 

La disponibilidad de resultados de PCR en el mismo día permite realizar una detección rápida de casos, que se complementa por técnicas de imagen realizadas en nuestro propio centro y un asesoramiento médico y farmacológico, capacitando a HC Marbella para ofrecer un diagnóstico y cuidado integral de COVID19 en menos de 24h.

 
 

En la actualidad se dispone de 2 diferentes tipos de pruebas diagnósticas que aportan información sobre las diferentes fases que pueda encontrarse un paciente contagiado por el SARS-CoV2:

 

  • Test que detectan la presencia de virus en el paciente, denominadas test Directos.
  • Test que demuestran que un paciente ha estado infectado a través de anticuerpos que ha creado frente al virus, denominadas test Indirectos

El laboratorio de HC Marbella dispone de ambas técnicas en sus propias instalaciones, lo que posibilita realizar un diagnóstico eficaz en un tiempo inferior a 24 horas, para poder evaluar, informar, tratar y aislar precozmente a sus pacientes.

 
 

 
 

1. Técnicas directas:

 

1.1 Detección del virus directamente a través de su ARN mediante la PCR

La detección de ARN de SARS-CoV2, en muestras respiratorias, es la técnica de referencia y de elección para el diagnóstico microbiológico de COVID-19.

 

Ventajas

  • Es la que tiene una mayor sensibilidad y especificidad para detectar la presencia de virus.
  • Se puede detectar ARN viral dos días antes que aparezcan los síntomas; tras los primeros síntomas la carga viral va aumentando progresivamente en la fase aguda, para posteriormente disminuir y hacerse indetectable tras 14-21 días.
  • En los casos clínicamente graves puede permanecer hasta 30 días positiva la PCR.
  • Permite detectar la presencia de portadores asintomáticos.
  • Confirma la eliminación del virus en pacientes que han tenido COVID-19.

 

Inconveniente

  • Es una técnica laboriosa y se necesita un laboratorio dotado de una habitación de Bioseguridad de nivel 2, de un equipamiento especial y de un personal especializado.

 

1.2. Detección del virus directamente a través de la detección del antígeno (proteínas del virus)

La detección directa de antígenos en muestra respiratoria se realiza mediante una reacción Antígeno-Anticuerpo.

 

Inconveniente

  • Escasa sensibilidad diagnóstica (se detecta menos del 50% de pacientes que sí tienen el virus).

 

Ante la opción de estas 2 técnicas directas

El laboratorio de HC Marbella ha apostado desde un primer momento por la técnica de referencia RT-PCR.

 

Para asegurar la mayor sensibilidad de la RT-PCR y evitar falsos negativos:

 

  • Optamos por detectar 3 dianas del genoma de SARS-CoV2, para así limitar los posibles cambios que puedan producir el virus en su continua evolución (evitando que algunas mutaciones afecten a la capacidad diagnostica de la PCR).
  • Como la rentabilidad diagnóstica depende en gran medida de cómo se toma la muestra, el equipo de enfermería está perfectamente entrenado y posee los conocimientos adecuados, para que se haga correctamente.

 
 
PCR para detección Coronavirus
 
 

2. Técnicas indirectas:

 

2.1. Detección indirectamente a través de la detección de anticuerpos IgG o IgM en muestras de sangre

Actualmente es, entre las 2 técnicas rápidas, la que presenta mayor sensibilidad y especificidad y se postula como una solución para detectar casos de infección pasada y para casos en evolución de más de una semana.

 

La presencia de IgM se produce entre los 7-10 de los inicios de los síntomas, y suele disminuir a partir de los 20 días, hasta desaparecer. La IgG se positiviza a partir de los 14-20 días y suele mantenerse durante un tiempo prolongado. Por lo tanto, el diagnóstico de infección de COVID19 basado en pruebas serológicas en la mayoría de casos solo será posible en la fase de recuperación, cuando muchas de las oportunidades de intervención clínica o interrupción de la transmisión de la enfermedad ya han pasado.

 

Ventaja

Esta cinética de Inmunoglobulinas, teóricamente podría tener utilidad para indicar en qué fase está el paciente, una vez haya contraído la enfermedad.

 

Inconvenientes

  • El inconveniente principal es que no sirve como diagnóstico precoz dado que se positiviza a partir del 7º-14º día de tener los síntomas.
  • La FDA advirtió la posibilidad de que se produzcan falsos positivos por enfermedades previamente pasadas por otros tipos de Cornavirus.
  • No en todos los individuos se produce la misma respuesta de anticuerpos tras una infección por coronavirus, pudiendo tardar más tiempo en producirse y no hacerlo con la misma intensidad, pudiendo dar falsos negativos. Esto podría darse por factores del paciente como la edad, estado nutricional, determinada medicación, pacientes VIH, estado inmunosupresivo del paciente, severidad de la enfermedad, etc.

 
 

3. Combinación de técnicas directas con indirectas:

 

3.1. Combinación de la PCR y la serología

Aunque la técnica de referencia para identificar y confirmar los casos de COVID-19 sigue siendo la RT-PCR, la detección de anticuerpos podría ser de utilidad con fines epidemiológicos y en algunos casos de infección aguda.

 

HC Marbella ofrece la realización de estas pruebas serológicas, previamente evaluadas, para determinar IgG e IgM y aportar información complementaria a la detección directa del virus por RT-PCR. La combinación de PCR y pruebas serológicas puede aportar una visión global de la fase del proceso en el que pueda encontrase el paciente.

 

Con la combinación de la PCR y la serología podremos clasificar a los pacientes según el riesgo de contagio por SARS-COV2:

 

  • Paciente infectado: PCR positiva
  • Paciente de riesgo: PCR negativa y IgG negativa
  • Paciente posiblemente inmunizado: PCR negativa y IgG positiva

 

Hay que advertir que la interpretación de las pruebas serológicas debe realizarse con cautela, teniendo en cuenta sus limitaciones, y evaluarlas acorde a la situación clínica del paciente y de los resultados de la prueba de referencia de RT-PCR. Aunque la presencia de IgG parece indicar una inmunización frente una reinfección frente al virus, aún no hay evidencias científicas que lo confirme con seguridad.

 
 
gráfica infección Coronavirus
 
 

 

PCR IgM IgG INTERPRETACIÓN
Negativo – No Inmunizado – Paciente en riesgo
+ Fase preclínica o clínica inferior a 7 días
+ + Fase aguda de la infección de 7-10 días
+ Fase activa de más de 7-10 (carga viral disminuida). Repetir PCR.
+ + Fase activa de más de 14 días (carga viral disminuida; buen pronóstico por IgG)
+ + + Fase activa de infección (posible buen pronóstico por IgG)
+ + Fase final – Infección de más de 14 días (o posible recurrencia)
+ Infección pasada y curada

 

Dr. Marco Antonio Sempere Alcocer

Especialista en Microbiología y Parasitología

 

 

abril 11, 2020

 

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